马里奥的兄弟叫路易吉。路易吉初次登场是在《马里奥兄弟》游戏中，作为马里奥的代表角色2P，与以红色服装为代表的马里奥相对应，身着绿色衣服。马里奥与他的双胞胎兄弟路易吉一起，长年担任任天堂的招牌角色。